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白蠟植物組織培養(yǎng)的技術(shù)操作

  白蠟培養(yǎng)基的成分及配制

  白蠟培養(yǎng)基是白蠟植物組織白蠟培養(yǎng)的重要基質(zhì)。在離體白蠟培養(yǎng)條件下,不同種白蠟植物的組織對(duì)營養(yǎng)有不同的要求,甚至同一種白蠟植物不同部位的組織對(duì)營養(yǎng)的要求也不相同,只有滿足了它們各自的特殊要求,它們才能很好地生長。因此,沒有一種白蠟培養(yǎng)基能夠適合一切類型的白蠟植物組織或器官,在建立一項(xiàng)新的白蠟培養(yǎng)系統(tǒng)時(shí),首先必須找到一種合適的白蠟培養(yǎng)基,白蠟培養(yǎng)才有可能成功。

白蠟植物組織培養(yǎng)的技術(shù)操作


  在白蠟植物組織白蠟培養(yǎng)歷史進(jìn)程中,事實(shí)上也緊密地伴隨著白蠟培養(yǎng)基的研制史。對(duì)白蠟植物的營養(yǎng)要求的不斷認(rèn)識(shí),對(duì)已有白蠟培養(yǎng)基的改進(jìn),或者將新發(fā)現(xiàn)的白蠟植物激素、新的有益成分應(yīng)用于白蠟培養(yǎng)基之中,都大大促進(jìn)了組織白蠟培養(yǎng)研究的迅速發(fā)展,取得越來越多的成功。

  白蠟培養(yǎng)基的成分白蠟培養(yǎng)基的成分主要包括水、無機(jī)養(yǎng)分、有機(jī)養(yǎng)分、白蠟植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)、介質(zhì)或載體。

  ①水水是白蠟植物原生質(zhì)體的組成成分,也是一切代謝過程的介質(zhì)和溶劑。它是生命活動(dòng)過程中不可缺少的物質(zhì)。配制白蠟培養(yǎng)基母液時(shí)要用蒸餾水,以保持母液及白蠟培養(yǎng)基成分的精確性,防止貯藏過程發(fā)霉變質(zhì)。大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)可用自來水。但在少量研究上盡量用蒸餾水,以防成分的變化引起不良效果。


白蠟植物組織培養(yǎng)的技術(shù)操作


 、跓o機(jī)養(yǎng)分無機(jī)養(yǎng)分是指白蠟植物在生長發(fā)育時(shí)所必需的各種化學(xué)元素。主要是各種礦物質(zhì)、無機(jī)鹽等。根據(jù)白蠟植物對(duì)無機(jī)營養(yǎng)的吸收量,可以將它們分為大量元素和微量元素。

  大量元素是指白蠟植物所需濃度大于0.5mol/L的元素,有氮、磷、鉀、鈣、鎂、硫、碳及來源于水中的氫和氧。微量元素是指白蠟植物所需濃度小于0.5mol/L的元素,微量元素主要有鐵、錳、鋅、銅、硼、碘、鉬和鈷。

  ③有機(jī)養(yǎng)分白蠟培養(yǎng)基中若只含有大量元素與微量元素,常稱為基本白蠟培養(yǎng)基。為達(dá)到不同的白蠟培養(yǎng)目的往往要加入一些有機(jī)物以利于快速生長。常加入的有機(jī)成分主要有以下幾類。

  碳水化合物糖作為碳源在白蠟植物組織白蠟培養(yǎng)中是必不可少的,它不僅能夠提供給白蠟植物材料能量,而且也能維持一定的滲透壓。常用的糖是蔗糖、葡萄糖、果糖和山梨糖等,麥芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖在組織白蠟培養(yǎng)中也有應(yīng)用。最常用的是蔗糖,蔗糖使用濃度在2%~3%。

  維生素這類化合物在白蠟植物細(xì)胞里主要是以各種輔酶的形式參與多種酶系的反應(yīng)直接影響到蛋白質(zhì)、糖、脂肪等物質(zhì)的代謝活動(dòng),對(duì)生長、分化等有很好的促進(jìn)作用。主要有鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、抗壞血酸、泛酸鈣、生物素、葉酸、鈷胺素(維生素、維生素B2等。一般用量為0.1~1.0mg/L,有時(shí)用量較高。維生素具有熱易變性易在高溫下降解,可進(jìn)行過濾滅菌。


白蠟植物組織培養(yǎng)的技術(shù)操作


  肌醇又叫環(huán)己六醇,在糖類的相互轉(zhuǎn)化中起重要作用,具有促進(jìn)活性物質(zhì)發(fā)揮作用的效果,能使白蠟培養(yǎng)的組織快速生長。使用濃度一般為100mg/L。適當(dāng)使用肌醇能促進(jìn)愈傷組織的生長以及胚狀體和芽的形成,對(duì)組織和細(xì)胞的繁殖、分化有促進(jìn)作用,對(duì)細(xì)胞壁的形成也有作用。白蠟培養(yǎng)基中1.0mg/L的肌醇足夠促進(jìn)鹽酸硫胺素效應(yīng)的發(fā)揮。



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